Normele din 18 februarie 2002

Capitolul 1 Condiții pentru aprobarea echipelor de colectare și de producere a embrionilor

A. Pentru a-i fi acordată aprobarea fiecare echipa de colectare a embrionilor trebuie să îndeplinească următoarele cerințe:

a) colectarea, prelucrarea și depozitarea embrionilor trebuie să fie efectuate fie de către un medic veterinar al echipei, fie, sub responsabilitatea sa, de către unul sau mai mulți tehnicieni competenți și instruiti de către medicul veterinar al echipei cu privire la metodele și tehnicile de igiena;

b) trebuie să se afle sub supravegherea generală și autoritatea medicului veterinar oficial;

c) trebuie să aibă la dispoziție instalații fixe sau mobile de laborator în care embrionii pot fi examinati, prelucrati și ambalati, constând în cel puțin o suprafața de lucru, un microscop și echipament criogenic;

d) în cazul unui laborator fix, acesta trebuie să dispună de:

1. o camera în care embrionii pot fi manipulati, adiacenta, dar separată fizic de zona utilizata pentru manipularea animalelor donatoare în timpul colectării;

2. o camera sau o zona echipata pentru curatarea și sterilizarea instrumentelor și echipamentului utilizat în colectarea și manipularea embrionilor;

3. când urmează să fie efectuată micromanipularea embrionului care implica penetrarea zonei pellucida, aceasta va fi realizată în instalații adecvate, cu flux laminar, care vor fi curatate și dezinfectate corespunzător între doua loturi;

e) în cazul unui laborator mobil, acesta trebuie să dispună de o parte special echipata a vehiculului, constând din două secțiuni separate:

1. una pentru examinarea și manipularea embrionilor, care va fi o secțiune curata; și

2. alta pentru adăpostirea echipamentului și materialelor utilizate în contact cu animalele donatoare.

B. Pentru a fi aprobată ca echipa pentru producerea și prelucrarea embrionilor rezultați din fertilizarea în vitro și/sau din cultura în vitro, aceasta trebuie să îndeplinească, pe lângă cele menționate la lit. A, următoarele cerințe suplimentare:

f) personalul trebuie să fie instruit cu privire la tehnicile corespunzătoare de laborator și de control al bolilor, în special referitor la procedurile pentru lucrul în condiții sterile;

g) trebuie să aibă la dispoziție un laborator de prelucrare fix, care să dispună de:

1. echipament și instalații corespunzătoare, incluzând o camera separată pentru recuperarea ovocitelor din ovare, și camere sau zone separate pentru prelucrarea ovocitelor și embrionilor, precum și pentru depozitarea embrionilor;

2. instalații cu flux laminar în care trebuie să fie prelucrate toate ovocitele, materialul seminal și embrionii; totuși centrifugarea materialului seminal poate fi efectuată în afară instalației cu flux laminar, atât timp cat sunt luate precautii complete de igiena;

h) când ovocitele și alte tesuturi urmează să fie colectate într-un abator, acesta trebuie să fie dotat cu echipament adecvat pentru colectarea și transportul ovarelor și al altor tesuturi la laboratorul de prelucrare, de o maniera sigura și igienica.

Un laborator mobil trebuie să aibă întotdeauna contact cu un laborator fix, pentru a se asigura sterilizarea echipamentului și aprovizionarea cu fluide și cu alte produse necesare pentru colectarea și manipularea embrionilor.

Capitolul 2 Condiții cu privire la colectarea, prelucrarea, depozitarea și transportul embrionilor de către echipa aprobată pentru colectarea embrionilor

1. Colectarea și prelucrarea:

a) embrionii trebuie să fie colectati și prelucrati de o echipa de colectare aprobată, fără a veni în contact cu oricare alte loturi de embrioni care nu îndeplinesc cerințele prezentei norme sanitare veterinare;

b) embrionii trebuie să fie colectati într-un loc izolat de alte părți ale clădirii sau exploatatiei și care trebuie să fie în buna stare și ușor de curatat și de dezinfectat;

c) embrionii trebuie să fie prelucrati, examinati, spalati, tratați și plasati în containere identificate și sterile, fie într-o instalatie de laborator fixa, fie într-o instalatie de laborator mobila, care nu este situata într-o zona supusă măsurilor de interdicție sau carantina;

d) toate instrumentele care vin în contact cu embrionii sau cu animalul donator în timpul colectării și prelucrării trebuie să fie inlaturate, dezinfectate sau sterilizate în mod corespunzător înaintea utilizării;

e) produsele de origine animala utilizate în timpul colectării embrionilor și în mediul de transport trebuie să fie obținute din surse care nu prezintă risc pentru sănătatea animalelor sau care urmează să fie tratate înaintea utilizării, astfel încât să fie prevenit un asemenea risc. Toate mediile și soluțiile trebuie să fie sterilizate prin metode aprobate conform recomandărilor manualului Societății Internaționale de Transfer al Embrionilor (IETS). Antibiotice pot fi adăugate mediilor în conformitate cu manualul IETS;

f) flacoanele de depozitare și flacoanele de transport trebuie să fie dezinfectate sau sterilizate în mod corespunzător înainte de începerea fiecărei operațiuni de umplere;

g) agentul criogenic utilizat nu trebuie să fi fost utilizat anterior pentru alte produse de origine animala;

h) fiecare container pentru embrioni și containerele în care sunt depozitati și transportați aceștia trebuie să fie marcate clar cu un cod, astfel încât să se poată stabili cu usurinta data colectării embrionilor, rasa și identitatea masculului donator și ale femelei donatoare, precum și numărul de înregistrare al echipei. Caracteristicile și forma acestui cod-marca vor fi stabilite în concordanta cu procedura naționala;

i) fiecare embrion trebuie să fie spălat de cel puțin 10 ori într-un fluid special pentru embrioni care trebuie să fie schimbat de fiecare data și care, în afară de cazul când s-a hotărât altfel în condițiile lit. m), trebuie să conțină tripsina, în concordanta cu procedurile recunoscute internațional. Fiecare lichid de spalare trebuie să fie o dilutie de 100 de ori a lichidului de spalare anterior, iar pentru transferul embrionilor, de fiecare data trebuie să fie utilizata o micropipeta sterila;

j) după ultima spalare fiecare embrion trebuie să fie supus unei examinari microscopice la un grosisment de cel puțin 50x pe întreaga sa suprafața, pentru a se determina dacă zona pellucida este intactă și libera de orice material aderent. Orice micromanipulare care implica penetrarea zonei pellucida trebuie să fie efectuată în instalații aprobate pentru acest scop, după ultima spalare și examinare. O astfel de micromanipulare poate fi realizată doar pentru un embrion având o zona pellucida intactă;

k) fiecare lot de embrioni care a trecut cu succes examinarea prevăzută la lit. j) trebuie să fie plasat într-un container steril, marcat în concordanta cu lit. h) și care va fi sigilat imediat;

l) atunci când se considera corespunzător, după caz, fiecare embrion trebuie să fie congelat cat mai curând posibil și depozitat într-un loc care se afla sub controlul medicului veterinar al echipei și care este supus unei inspecții periodice de către un medic veterinar oficial;

m) în concordanta cu procedura naționala autoritatea sanitară veterinara centrala a României trebuie să elaboreze, în termen de 60 de zile de la data intrării în vigoare a prezentei norme sanitare veterinare, un protocol cu privire la lichidele de clatire și de spalare autorizate, la tehnicile de spalare și, după caz, la tratamentele enzimatice, împreună cu mediile de transport autorizate. Până la adoptarea unui protocol cu privire la tratamentele enzimatice vor continua să se aplice regulile naționale cu privire la utilizarea tripsinei;

n) fiecare echipa de colectare trebuie să trimită probe de rutina din lichidele de clatire, lichidele de spalare, embrionii dezintegrati, ovulele nefertilizate etc., rezultate din activitățile sale, pentru o examinare oficială privind contaminarea bacteriana și virala. Procedura pentru colectarea probelor, realizarea unor astfel de examinari, împreună cu standardele ce urmează să fie realizate, vor fi decise în concordanta cu procedura naționala. Dacă standardele stabilite nu sunt respectate, autoritatea competentă care a acordat aprobarea oficială echipei trebuie să retragă acea aprobare;

o) fiecare echipa de colectare trebuie să țină o evidenta a activităților sale cu privire la colectarea embrionilor pentru o perioadă de 12 luni înainte și 12 luni după depozitare, incluzând:

(i) rasa, vârsta și identificarea animalelor donatoare vizate;

(îi) locul de colectare, prelucrare și depozitare a embrionilor colectati de echipa;

(iii) identificarea embrionilor, împreună cu detalii privind destinația lor, dacă se cunosc;

(iv) detalii despre tehnicile de micromanipulare care implica penetrarea zonei pellucida sau alte tehnici, cum ar fi fertilizarea în vitro și/sau cultura în vitro care au fost realizate cu privire la embrioni. În cazul embrionilor rezultați din fertilizarea în vitro identificarea poate fi facuta pe bază de lot, dar trebuie să conțină detalii privind data și locul de colectare a ovarelor și/sau ovocitelor. De asemenea, trebuie să fie posibila identificarea efectivului de origine a animalelor donatoare;

p) condițiile stabilite la lit. a)-o) trebuie să se aplice, după caz, colectării, prelucrării, depozitarii și transportului de ovare, ovocite și de alte tesuturi destinate fertilizarii în vitro și/sau culturii în vitro. În plus, trebuie să se aplice următoarele condiții suplimentare:

(i) când ovarele și alte tesuturi urmează să fie colectate într-un abator, acesta trebuie să fie aprobat oficial și să se afle sub controlul unui medic veterinar oficial, a cărui responsabilitate este să efectueze inspecția ante-mortem și post-mortem a donatorilor;

(îi) materialele și echipamentul care vin în contact direct cu ovarele și cu alte tesuturi trebuie să fie sterilizate înainte de utilizare, iar după sterilizare trebuie să fie utilizate exclusiv în aceste scopuri. Trebuie să fie utilizat un echipament separat pentru manipularea ovocitelor și a embrionilor de la loturi diferite de animale donatoare;

(iii) ovarele și alte tesuturi nu vor fi introduse în laboratorul de prelucrare până la finalizarea inspecției post-mortem a lotului. Dacă este constatată o boala importanța în lotul donatorilor sau la orice animal tăiat în acel abator în acea zi, toate tesuturile provenind de la acel lot trebuie să fie identificate și eliminate;

(iv) procedurile de spalare și de examinare stabilite la lit. i) și j) trebuie să fie efectuate după ce procedura de cultivare s-a încheiat;

(v) orice micromanipulare care implica penetrarea zonei pellucida trebuie să fie efectuată în concordanta cu prevederile lit. j), după ce au fost finalizate procedurile stabilite la pct. (iv);

(vi) în aceeași fiola/paieta trebuie să fie depozitati numai embrionii din același lot de donatori.

2. Depozitarea:

a) fiecare echipa de colectare sau de producere a embrionilor trebuie să se asigure ca embrionii sunt depozitati la temperaturi corespunzătoare, în clădiri aprobate pentru acest scop de către autoritatea competentă. Pentru a fi aprobate aceste clădiri trebuie:

(i) să dețină cel puțin o camera ce se poate incuia, destinată exclusiv depozitarii embrionilor;

(îi) să fie ușor de curatat și dezinfectat;

(iii) sa dispună de evidente permanente ale tuturor miscarilor de intrare și ieșire a embrionilor. Destinația finala a embrionilor trebuie să fie specificată în aceste evidente;

(iv) să fie supuse inspecției medicului veterinar oficial;

b) autoritatea sanitară veterinara competența poate autoriza depozitarea materialului seminal care îndeplinește cerințele legislației comunitare specifice, transpusa în legislația veterinara naționala, referitoare la cerințele de sănătate a animalelor, aplicabile comerțului intracomunitar și importului de material seminal congelat provenit de la animale domestice din specia bovine, în clădirile de depozitare aprobate.

3. Transportul:

a) embrionii destinați comercializării trebuie să fie transportați din incintele de depozitare aprobate până la sosirea lor la destinație în condiții igienice satisfăcătoare, în containere sigilate;

b) containerele trebuie să fie marcate astfel încât acel număr sa coincida cu numărul de pe certificatul de sănătate animala.